Cell Counting
다양한 방법, 기법, 기술을 이용한 세포 계수법에 대해 알아보십시오.
Cell Counting 방법과 기법
Multi-Well Microplate에서 세포의 수를 정확하게 정량하는 능력은 세포의 건강상태나 증식을 연구하는 다양한 Biological Application에 적용할 수 있습니다. 이런 실험분야는 핵을 형광으로 염색한 샘플을 Imaging하는 Endpoint Assay 혹은 Transmitted Light에서 염색하지 않은 Live Cell, Fixed Cell 등을 수월하게 이미징하는 작업이 필요합니다. 두 가지 방법 모두, 소프트웨어를 이용하여 이미지를 세분화하여 세포를 계수하는 과정이 필요하며, 빠르고 신뢰할 만한 데이터를 형성해야합니다.
여기에서는 우리는 Cell Counting을 Cell의 Proliferation, Cytotoxicity, Confluence 등을 측정할 수 있는 기술에 대해 이야기하려고 합니다. Cell Counting은 자동화 Imaging 시스템과 분석 소프트웨어를 사용하여 Brightfield(Brightfield)와 형광 이미징을 통해 빠르게 달성됩니다.
자동화 세포 이미징을 사용한 Cell Counting
Cell Counting(세포계수)는 다양한 생명현상 실험에서 사용되는 기본적이고 중요한 분석입니다. 약물 Compound의 독성, Cell Proliferation, Cell Division의 억제 등을 분석하기 위해서는, Well 안에 있는 세포의 숫자와 밀도를 측정해야 합니다. 자동화 이미징을 사용하면, 수작업으로 인한 인적오류를 줄이고, 놀라운 속도로 Cell Counting을 할 수 있게 됩니다.
아래의 실험과정에서 보여주는대로, ImageXpress® Pico Automated Cell Imaging System에 세포를 넣고, 간단히 소프트웨어를 설정하면, 시스템이 자동으로 세포 수를 계산해줍니다. 결과가 나올 때까지 기다릴 필요가 없습니다. 세포는 다양한 방법으로 Counting될 수 있는데, Label-Free Cell을 Transmitted Light 상에서 Counting하거나, 핵을 염색하여 형광 이미징을 할 수도 있습니다.
StainFree Cell Detection 기술: Cell 분석과 Counting, Confluence 측정을 위한 label-free method
기존에 Imaging 기반의 Cell-Based Assay는 일반적으로 살아있는 세포에 독성을 가질 수 있는 형광물질을 부착하거나, 혹은 Fixed Cell에서만 시행할 수 있었습니다. Label Free로 세포 염색 없이 Cell Counting, Cell Confluence하게 될 경우, 실험과정이 오래 걸리지 않으면서, Cell Viability를 저해하지 않으면서도 Cell Proliferation과 세포의 건강상태를 정량적으로 모니터링할 수 있습니다
SpectraMax® MiniMax™300 Imaging Cytometer가 장착된 SpectraMax® i3 Multi-Mode Microplate Reader는 특허 출원 중인 특별한 기술인 StainFree™ Cell Detection Technology를 이용합니다. 핵에 삽입되는 DAPI와 같은 염색시약, 혹은 장기간 세포에 직접적인 독성이 되는 Live Cell Dye 등이 없어도 세포 생장, 세포독성 및 다른 assay를 수행할 수 있습니다.
StainFree 기술과 Live Red Dye 및 DAPI 세포 분석 실험과정 비교 - StainFree 실험과정은 DAPI를 이용해서 고정하고 염색하는 절차보다 70분 정도 시간을 절약합니다. 또한 StainFree 기술을 사용하여 분석한 세포는 살아있기 때문에, 이후 추가적인 assay에 이용할 수 있습니다.
StainFree 기술을 이용한 Cell Counting
Stainfree cell detection 알고리즘은 자사의 보유기술인 투과광(TL) 분석 기술을 사용하여 염색 없이도, Cell Counting, Cell Confluence를 측정합니다. Label Free Method를 사용한 다양한 분석법에 대해서 설명해드립니다.
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SpectraMax Minimax cytometer 또는 ImageXpress ® Pico Automated Cell Imaging System을 사용하는 SpectraMax® i3x Multi-Mode Microplate Reader와 같은 자동화 Cell Counting 분석기기는 Brightfield 또는 형광 이미징으로 생장, 세포독성, 또는 컨플루언시를 평가할 수 있습니다.
SpectraMax Minimax cytometer를 장착한 SpectraMax i3x Multi-Mode Microplate Reader로 신속하게 세포 이미징과 분석을 수행하고, 세포독성, 세포 생장, 단백질 발현에 대한 표현형의 변화를 가까이에서 관찰할 수 있습니다. 당사의 StainFree™ Cell Counting 기술에는 형광 녹색 및 적색 감지 채널과 추가적인 Brightfield 분석 기능이 포함됩니다.
ImageXpress Pico Automated Cell Imaging System은 투과광이나 형광 이미징을 이용한 자동화 Cell Counting 분석기기로 핵 크기, 전체 및 평균 세포 영역, 강도와 같은 풍부한 데이터가 포함된 결과를 보여줍니다. 형광 핵이나 세포체를 검출하기 위한 표준 Cell Counting법 이외에도, 이 소프트웨어에는 세포 크기 및 형태별로 투과광을 이용한 Cell Counting과 관련된 세 가지 추가적인 프로토콜이 포함됩니다.