Live Cell Imaging
세포의 생체 내 속성을 가장 잘 모방할 수 있는 Assay 개발
Live Cell Imaging이란?
Live cell imaging은 현미경 관찰을 통해 살아 있는 세포의 세포내 구조 및 기능을 연구합니다. 동적인 세포 과정을 실시간으로 시각화 및 정량화할 수 있습니다. 생체 내에서 세포 및 세포하 구조, 기능, 세포 내 소기관을 연구하는 기능은 생물학적 연관성이 더 높고, 신약 후보물질에 대한 인체의 반응을 더 잘 예측하는 assay를 개발하는 데 도움이 됩니다. Live cell imaging은 장기적인 Kinetics assay 또는 Live Cell의 형광 표지를 수행하는 광범위한 생물학적 응용 분야와 주제를 포괄합니다.
Live Cell 연구의 장점
Live cell imaging은 세포 생물학 실험실과 여러 광범위한 산업 분야에서 기본적인 연구 도구로, 약물 표적과 후보물질 발굴을 비롯하여 질병과 연관된 분자적 작용기전을 밝혀내기도 했습니다. 연구자들에게 중요한 기능은 세포의 in vivo 속성을 가장 잘 모방할 수 있는 Assay를 개발하는 것입니다. Live Cell imaging의 이점은 다음과 같습니다.
- 시간에 따른 Live Cell 모니터링은 세포 내에서 발생하는 단편적인 사건 이상을 보여줍니다. Endpoint assay에서 누락될 수 있는 일시적 사건을 시각화하고 Endpoint assay를 위한 최적의 시점을 알아낼 수 있습니다.
- 환경적 조건을 엄격하게 조절하면 세포 구조와 과정이 본래의 생리적 상태로 유지되도록 할 수 있습니다.
- 자연 상태의 Live Cell Imaging은 세포 고정 및 면역염색법과 같은 다른 이미징 기법에서 발생할 수 있는 아티팩트를 최소화합니다.
- 다중 경로를 통한 세포 생체 분자의 국소화 및 수송을 동시에 실시간으로 연구할 수 있습니다.
- 외측, 축상, 시간별 이미지를 획득하면 4D 이미지와 데이터를 생성할 수 있습니다.
- 분자 동역학의 live cell imaging은 다른 생화학적 방법으로 얻을 수 없는 정성적, 정량적 데이터를 생성합니다.
- 세포 플레이팅을 위해 다양한 실험기구(챔버 슬라이드, 디쉬, Microplate)를 이용합니다.
- 세포 처리 – assay 워크플로의 일부인 경우, 원하는 화합물과 RNAi 등을 이용하여 세포 처리를 수행하십시오.
- 표지자 염색이 필요한 경우, 원하는 형광단(형광 염료, 형광 단백질-펩타이드 융합 등)을 이용하여 세포를 표지합니다.
- 환경 통제 – 획득 시간이 오래 걸리거나 Assay가 Live Cell Time Lapse 실험(연속 또는 불연속)인 경우, 기체, 온도, 습도를 포함한 전체 환경을 통제할 수 있습니다.
- 세포 이미지 – 플레이트를 자동화 Imaging 시스템에 놓고 Live Cell 이미지 획득을 시작합니다.
- 세포 이미지 분석 - 세포 이미징 분석 소프트웨어를 사용하여 Live Cell 이미지의 정량적 분석을 실행합니다.
Live cell imaging 시스템
정교한 Live Cell Imaging 시스템은 단일 세포에서 유기체 수준까지 분자 및 Cellular Dynamic을 모니터링하는 동시에 환경 조건을 조절하여 세포의 건강 상태와 Viability를 유지할 수 있도록 합니다. 고속 운동 사건 연구에서부터 장기적인 Timelapse assay의 실행에 이르기까지, 자동화 Live Cell Imaging은 역동적인 생물학적 과정을 직접 관찰할 수 있게 하며 풍부한 세포 정보를 제공합니다.
- 다색 형광 이미징에 대한 Label Free, Brightfield 이미징 기능은 여러 Live Cell Imaging 응용 분야에 필수적인 유연성을 제공합니다.
- 높은 획득 속도를 통해 심근세포의 칼슘 진동과 같이 고속 운동 사건을 조사합니다.
- 자동화 live cell imaging 분석기기의 로버스트한 초점 조정 기능으로, 전체 획득 과정에서 최적의 초점을 유지하여 정확한 live cell imaging 데이터의 생성에 중요한 역할을 합니다.
최신 자료
Live Cell Imaging과 분석 실험과정
설명된 live cell imaging 실험과정은 연속적 장기 Timelapse Live Cell assay의 일반화된 예시입니다. 이 실험과정은 세포 플레이팅에서 이미지 분석에 이르는 단계를 세분화하여 자동화 high-content imaging 시스템과 세포 이미징 및 분석 소프트웨어를 포함한 Live Cell assay를 실행하는 데 필수적인 자료와 분석기기를 강조합니다.