세포 이미징: 획득 및 분석
연구자들은 온전한 세포를 보여주는 위상차 현미경부터 단일 분자나 세포소기관의 형광 이미징에 이르는 여러 가지 세포 이미징 방법을 사용할 수 있습니다. 세포 무결성, 세포독성, cell viability와 같은 세포의 현재 상태의 평가 및 측정을 위해 세포 분석을 수행하며, 여러 다른 연구 응용 분야에서도 사용됩니다. 세포 분석에는 데이터를 수집 및 분석하고, 이를 의미 있고 유용한 형식으로 내보내는 통합적인 과정이 포함됩니다.
세포 분석 워크플로
세포 배양, 플레이팅, 유지를 위한 프로토콜은 세포 모델에 따라 다르나, 아래에서는 세포 기반 이미징 assay를 위해 high-content imaging 시스템과 세포 분석 소프트웨어를 이용한 업스트림 배지 준비에서부터 다운스트림 실험 분석을 포함하는 전반적인 실험과정 단계를 개괄합니다.
- 세포 플레이팅을 위해 다양한 실험기구(챔버 슬라이드, 디쉬, Microplate)를 이용합니다.
- 세포 처리가 assay 워크플로의 일부인 경우, 원하는 화합물을 이용하여 세포를 처리합니다.
- 표지자 염색이 필요한 경우, 원하는 형광단(형광 염료, 형광 단백질-펩타이드 융합 등)을 이용하여 세포를 표지합니다.
- 세포 이미지 획득을 위해서는 플레이트를 세포 Imaging 시스템에 놓고 Live Cell 이미지 획득을 시작합니다.
- 세포 이미지 분석 - 세포 이미징 분석 소프트웨어를 사용하여 Live Cell 이미지의 정량적 분석을 실행합니다.
High-content 및 자동 이미징으로 스크리닝 가속화
이 기술 웨비나는 바이러스 연구, Neurite Outgrowth 연구, 오가노이드 모델과 같이 High-Content Screening 응용 분야에 중점을 둡니다. 제공된 정보는 현재 세포 기반 Assay와 Live-Cell Imaging 작업을 하고 있거나 현행 Imaging 실험과정을 자동화 및/또는 규모 증가를 원하는 연구자들에게 적용됩니다.
세포 이미징 방법의 유형
High-content 및 high-throughput 또는 사용이 간편한 시스템이 필요한 경우, 당사의 세포 이미징 솔루션을 이용하면 스크리닝 또는 연구 실험실의 요구에 적합한 방식으로 이미지를 획득 및 분석할 수 있습니다. 여기에서는 여러 가지 세포 이미징 방법을 간략히 설명해 보겠습니다.
- 위상차 현미경은 온전한 세포를 보여줍니다.
- 형광 이미징은 단일 분자나 세포소기관을 보여줄 수 있습니다.
- Brightfield 현미경은 전체 세포를 빠르게 시각화하는 데 유용합니다.
- 공초점 현미경은 고품질 이미지와 세포의 3D 재구성에 선호됩니다.
- 4D live cell imaging은 Timelapse 현미경과 공초점 현미경의 결합입니다.
- 자동화 현미경은 전체 시야에서 로버스트한 초점값을 가지도록 하는 소프트웨어와 하드웨어를 활용하며, 반복 가능하며 주관적인 정량적 데이터를 생성하는 정교한 이미지 분석 소프트웨어도 함께 사용합니다.
일반적인 세포 기반 assay와 응용 분야
여기에서는 3D cell culture부터 줄기세포 연구에 이르는 여러 Cell Based Assay의 주제와 함께 심근세포 및 독성 스크리닝에 대한 적용과 관련된 내용을 중점적으로 다루어 보았습니다.