리즈 대학, ImageXpress Pico를 이용하여 단백질 기능 조사
기업/대학교
리즈 대학
팀 구성원
Darren Tomlinson
Heather Martin
사용한 제품
ImageXpress Pico Automated Cell Imaging System
도전
영국 리즈 대학의 분자 및 세포 생물학 교실, Tomlinson 실험실은 분자 수준에서 단백질 기능을 조사합니다. Darren Tomlinson의 연구그룹은 단백질 기능을 연구하기 위해 Affimer라는 새로운 분자 인식 도구의 사용에 관심이 있습니다. Affimer(Adhiron이라고도 알려짐)는 분자 인식을 위한 두 개의 무작위 루프로 구성된 스캐폴드 단백질입니다. 진단 등의 응용 분야에서 항체에 대한 대체 시약으로서 사용될 수 있으며, 단백질 기능과 연관된 핵심 영역을 식별하기 위한 표적 단백질의 표면을 프로브하는 데 사용될 수 있습니다. 이 실험실은 여러 유형의 분자에 대한 스크리닝 서비스를 제공하나, Affimer 스캐폴드를 사용하여 분자 수준에서 단백질 기능을 이해하는 것에 중점을 둡니다.
이 Affimer를 연구하기 위해, 연구그룹에는 작은 규모의 스크리닝을 실행할 수 있는 사용이 쉬운 시스템이 필요했습니다.
솔루션
연구그룹은 다른 high-content imaging 시스템의 대안으로 저렴하고 사용자 친화적인 ImageXpress Pico를 선택하였습니다.
ImageXpress Pico Automated Cell Imaging System
사용한 제품
ImageXpress® Pico Automated Cell Imaging System은 고해상도 이미징을 강력한 분석과 결합하여 디지털 현미경보다 우수합니다. 형광 이미징 또는 Brightfield assay를 실행하는 경우, 자동화 이미저에 포함된 종합적이며 사전 구성된 Cell Based Assay 프로토콜 포트폴리오가 학습 곡선을 단축하므로 실험 실행을 빠르게 시작할 수 있습니다. Digital Confocal* 2D On-the-fly 데콘볼루션, 라이브 미리보기 및 다중 파장 세포 점수화와 같은 기능을 갖춘 ImageXpress Pico는 소형이며 합리적인 가격의 이미저로 발견의 수준을 높일 수 있도록 지원해 드립니다…
결과
연구그룹은 소규모 스크리닝에는 ImageXpress Pico를 주로 사용하여 다양한 세포 내 단백질을 표적으로 하는 Affimer 단백질이 표적 단백질의 다운스트림 신호전달 경로에 미치는 영향을 살펴봅니다. 한 예시로서, 그림 1은 인산화 ERK로 염색(오렌지색)된 마우스 배아 섬유아세포를 GFP 태그 Affimer(녹색)로 transfection한 상태를 보여줍니다. 이는 Affimer를 표적으로 하는 단백질이 EGF 자극 pERK 발현을 감소시킴을 입증합니다.
또한 온도 제어 기능이 특히 유용한 시간 경과 실험에 ImageXpress Pico를 사용합니다.
2~3개의 형광단/플레이트를 사용하므로 현재 assay에 따라 하루 약 3~4개 플레이트를 이미징하고 있습니다.
그림 1: 인산화 ERK(오렌지색)로 염색된 마우스 배아 섬유아세포에 GFP 태그 Affimer(녹색)를 transfection. 화살표는 pERK 염색의 감소가 명확하게 관찰되는 Affimer 발현 세포를 강조합니다. 이미지는 20배율에서 ImageXpress Pico로 획득하였습니다.