단일클론항체 생산

기존의 단일클론항체(mAb) 생산 과정은 보통 원하는 항체 생성 비장 세포(예: B세포)와 골수종 세포를 융합하여 mAb 생성 세포(예: 하이브리도마)를 생산하는 것부터 시작합니다. 이 B세포는 일반적으로 동물에서 유래하며, 보통은 마우스를 사용합니다. 세포 융합 후, 다수의 클론을 항원 특이성, 면역글로불린 분류에 기반하여 스크리닝 및 선택합니다. 후보 하이브리도마 세포주가 식별되면, 다양한 정제 공정의 기능적 assay를 이용하여 각 ‘유효물질’을 확인, 검증, 특성 분석하게 됩니다. 작업이 완료되면, 추가 정제 생물공정이 발생할 수 있도록 클론의 스케일을 증가시킵니다.

일반적인 단일클론항체 생산 공정.

일반적인 단일클론항체 생산 공정

  1. 마우스의 면역화 및 비장 세포의 분리 -항원으로 마우스가 면역화되면, 이후 항체 생성을 위해 혈액을 스크리닝합니다. 그런 다음, 항체 생성 비장 세포는 생체 외 하이브리도마 생산을 위해 분리됩니다.
  2. 골수종 세포의 준비 - 골수종 세포는 불멸화 세포로, 비장 세포와 융합되면 무한정 생장이 가능한 하이브리도마를 만들 수 있습니다. 융합을 위해 골수종 세포를 준비합니다.
  3. 융합 - 폴리에틸렌 글리콜(PEG)이 존재하는 경우 골수종 세포와 분리된 비장 세포가 융합되어 하이브리도마를 형성하고, 이로 인해 세포막이 융합됩니다.
  4. 클론 스크리닝 및 피킹 - 항원 특이성, 면역글로불린 분류에 기반하여 클론을 스크리닝 및 선택합니다.
  5. 기능적 특성 분석 - 각 잠재적 고생산 콜로니를 확인, 검증 및 특성 분석(예: ELISA)합니다.
  6. 스케일 증가 및 중단 - 원하는 항체를 생성하는 클론의 스케일을 증가시키고 선택제제를 중단합니다.
  7. 확장 - 원하는 항체(예: 생물반응기 또는 대형 플라스크)를 생성하는 클론을 확장합니다.

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