QuickID 표적 이미지 획득
QuickID 표적화 획득
QuickID 표적화 획득은 저배율에서 샘플의 전체 시야(Fov)를 획득하여 작동하며, 대상 물체나 희소한 반응을 빠른 이미지 분석 과정을 통해 찾고, 고배율에서 연관된 파장, z스택, 시점을 포함하는 사용자 지정 프로토콜로 이러한 Well 또는 영역만을 재획득합니다.
표적화 이미지 획득은 MetaXpress 소프트웨어를 통해 수행되며, ImageXpress High Content Imaging 시스템을 사용할 수 있습니다.
QuickID 표적화 획득을 이용한 이미징 효율성 증가
이미지 기반 high content screening을 수행하는 연구자들은 샘플의 High Resolution, 다중 파장에서 z평면 전체 범위를 이미징할 필요가 있는 경우 여러 기술적인 어려움에 직면할 수 있습니다. 이런 실험은 보통 긴 획득 시간(몇 시간에서 2일 정도 사이)이 걸리고, 큰 이미지 저장 공간(100GB)이 요구되며, 관리할 수 있는 이미지 분석 시간(더 적게 걸릴수록 좋음)을 유지하기 위한 고도의 계산력이 필요합니다.
이 모든 어려움을 최소화하는 간단한 방법은 대상 물체를 포함한 Microplate나 슬라이드의 시야 영역만을 획득하는 것입니다. 이 기법은 각 샘플에 대상 물체가 거의 존재하지 않는 경우, 공간에 무작위로 분포되어 있는 경우, 또는 일부 마이크로Well에서만 희소하게 발생하는 경우에 특히 유용합니다. 이 솔루션을 당사의 high-contetn imaging 시스템과 이미지 분석 소프트웨어와 함께 사용하면 결과 도출 시간과 이미지 저장 필수요건을 크게 줄여줍니다.
3D 세포 배양에서 10배 더 빠르게 데이터 획득
응용 분야 노트 ‘Symphony®과 VersaGel®을 사용하여 배양한 3D 스페로이드로부터 10배 더 빠르게 데이터를 획득‘에서는 광선 교차 결합 가능한 수화젤이 3차원 공간에서 1~4개 스페로이드/웰을 생장시키는 매트릭스로 사용되었습니다. 염색 이후, 2배율 대물렌즈를 이용하여 하나의 시야 내 전체 웰을 캡처하기 위해 QuickID가 수행되었습니다. 대상 물체가 식별되고 X, Y 좌표가 자동으로 표시된 뒤, ImageXpress Micro 시스템이 10배율로 3가지 파장을 이용해 다중 z평면의 연관된 이미지만을 획득하였습니다. 고배율로 모든 Well의 전 영역을 이미징하는 것보다 QuickID를 이용하였을 때 획득 시간이 10배 더 빨랐으며, 또한 필요한 저장 공간이 20배 줄었습니다.
QuickID는 스페로이드 이미지 획득을 간소화하기 위해 사용되었습니다. 하나의 시야에서 전체 Well을 보기 위해 저배율로 획득한 이미지는 자동 재이미징을 위해 더 높은 배율에서 3가지 파장을 이용해 다중 z평면의 물체를 식별하는 데 사용되었습니다.
FoV 중심의 자동 3D 스페로이드 이미징
스크리닝 항종양 약물에 대한 스페로이트를 배양하기 위한 여러 방법이 있습니다. 일부 형식에서는 스페로이트가 항상 웰의 중심에 있는 것이 아니므로 고배율의 단일 시야(FOW)에서 대상 물체를 획득하기 어렵습니다. QuickID는 20배율 수침 대물렌즈를 이용하여 FoV 중심에서 각 스페로이드를 자동으로 이미징할 수 있도록 하여, 추가 영역의 획득 없이 다중 파장에서 z스택을 수집할 수 있도록 합니다.
QuickID는 전체 마이크로플레이트를 빠르게 이미징할 수 있도록 10배율 대물렌즈를 이용하여 시행하였습니다. 이후, 구형 물체를 식별하고, X 및 Y 좌표를 사용하여 여러 파장 및 z평면에서 20배율 수침 대물렌즈로 종양 미세 조직을 포함한 단일 영역을 자동으로 획득하였습니다. 3D 부피 내의 물체를 찾고 측정하기 위해 이미지 분석이 수행되었습니다.
표적화 획득에 대한 기타 응용 분야
QuickID는 과정을 간소화하므로, 연관된 이미지만 획득하여 상당한 시간을 절약하고 저장 필요성을 줄입니다. QuickID의 사용이 도움이 되는 다른 응용 분야의 예시에는 세포 분열이나 모델 유기체의 Live Imaging 및 슬라이드 조직 절편에 대한 특정 영역의 이미징이 포함됩니다.