워크플로: 플라스미드 생산
 
어셈블리

어셈블리

표적 유전자(관심 유전자)는 원하는 특성을 가진 벡터에 연결되어 재조합 플라스미드를 형성합니다. 이는 Gibson 어셈블리 또는 Golden Gate 어셈블리를 포함한 다양한 기법을 통해 실시할 수 있습니다.

어셈블리 실험과정
01
Transformation
Transformation 실험과정

Transformation

Ligation 산물은 유능한 박테리아 세포에 도입되어 조작된 플라스미드의 미생물 흡수 및 다중 플라스미드 카피 생성을 허용합니다.

02
콜로니 플레이팅 및 Screening

콜로니 플레이팅 및 Screening

미생물 세포를 고체 한천 플레이트에 도말하여 개별 콜로니로 생장시킨 다음 Screening하여 피킹에 적합한 특성을 가진 세포를 식별합니다.

콜로니 플레이팅 및 Screening
03
>QPix 미생물 콜로니 피커

QPix 미생물 콜로니 피커

콜로니 피킹

콜로니 피킹

원하는 콜로니가 확인되면 고체 한천 플레이트에서 피킹하여 하룻밤 동안 생장시키고 배양하기 위해 액체 배지로 이를 옮길 수 있습니다.

04
하룻밤 배양

하룻밤 배양

액체 배지가 있는 생장 플레이트를 밀봉하고 진탕 배양기로 옮겨 미생물이 분열해 더 많은 재조합 플라스미드 카피를 생성하도록 합니다.

하룻밤 배양
05
기질 첨가
기질 첨가

Mini Prep

미생물을 용해시켜 재조합 플라스미드를 추출합니다. 그런 다음 컬럼 또는 비드 기반 방법을 사용하여 플라스미드를 정제하여 고순도 DNA를 얻습니다.

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