파지 디스플레이를 이용한 항체 발굴

파지 디스플레이

파지 디스플레이는 펩타이드, DNA, 기타 단백질과 같은 다른 분자를 이용하여 박테리오파지의 표면에 나타나는 단백질과의 상호작용을 연구하는 데 사용되는 기법입니다. 파지 디스플레이는 바이러스의 발병기전, 백신, 다른 치료에서 중요한 역할을 하는 항체와 항원 간 친화성이 높은 상호작용을 찾기 위해 일반적으로 사용됩니다.

동영상을 시청하고 응용 과학자인 레베카 크레이프케와 함께 당사의 솔루션으로 파지 디스플레이 워크플로를 가속화하십시오.

https://share.vidyard.com/watch/Q17RnfyoKg9b2ZbWmstzRh

파지 디스플레이 워크플로

파지 디스플레이의 워크플로 효율성을 높이는 자동화 솔루션

파지 디스플레이 워크플로는 사용이 쉽고 확실하며 저렴한 방법으로, 잠재적, 임상적으로 연관성이 있는 최대 수십억 개의 항체가 포함된 대규모 조합 라이브러리에서 특이적인 고친화성 항원을 식별합니다. 특히 자동화된 솔루션의 이점을 활용하는 데 있어 적합하며, 가장 유망한 항체 표적을 식별하고 패스트 트랙 신약 개발을 위한 작업량을 줄일 수 있습니다.

파지 디스플레이를 이용한 항체 발굴 워크플로

파지 디스플레이 단계

1단계: 패닝

패닝은 대상 표적에 더 높은 친화성 결합을 보유한 모집단 내의 파지를 농축하기 위한 반복 공정입니다. 먼저 라이브러리를 선택한 항원에 노출시킨 뒤 가장 높은 binding affinity를 가진 항원만 용리 및 증폭시켜 파지의 population을 농축합니다.

2단계: 콜로니 피킹

각 고유 단백질 결합체를 분리하기 위해 이전 단계에서 선택한 박테리오파지를 클로닝하여 선택합니다.

3단계: 항원-항체 상호작용

패닝 과정 동안 binding affinity가 더 낮았던 단백질을 표시하는 파지에 비해 binding affinity가 더 높은 단백질을 표시하는 파지를 선택합니다. 이 선택 과정은 정성적이므로 항체-항원 상호작용을 평가하는 보다 정량적인 immunoassay(예: ELISA, 면역형광, HTRF, 보체 고정, 응집작용 및/또는 침전)을 사용하여 검증할 필요가 있습니다.

4단계: 기능적 스크리닝

항체-항원 상호작용을 특성 분석한 뒤, 후보 분자를 기능적 활성(예: 바이러스 중화 또는 백신 유효성)에 대해 스크리닝합니다. 보통 세포 기반 assay를 사용합니다.

항체 생산을 위한 파지 디스플레이 기술

QPix™ 시스템은 파지 디스플레이 항체를 스크리닝하여 실험과정을 가속화합니다

파지 디스플레이는 단백질의 상호작용 결정과 단백질 제조에서 높은 처리 능력을 갖추고 있어 바이오테크에서 합성 생물학에 이르는 산업 응용 분야에서 사용되고 있습니다. 그러나, 파지 라이브러리 (\약 107~1012)에서 나이브 표적을 인식할 수 있는 고친화성 결합체나 리간드를 선택하려면, 비결합성 박테리오파지를 씻어 낸 뒤 표적 분자에 특이적으로 결합하는 파지를 3~5 회의 패닝으로 용리 및 회수해야 합니다. 통상적인 방법을 이용하는 경우 서로 다른 항원을 사용해 동시에 다중 선택 Screening을 수행할 때 작업량이 많을 수 있습니다. 스크리닝 속도를 높이고자, 과학자들은 QPix™ 시스템과 같은 새로운 기술을 실험과정에 통합하여 파지 디스플레이 항체 스크리닝을 가속화하고 있습니다.

파지 디스플레이

QPix 시스템은 클론의 플레이팅 및 피킹 자동화와 전체 파지 라이브러리 관리 시스템에 적합합니다.

  • 98% 이상의 효율성으로 시간당 클론 3000개의 속도로 피킹.
  • 일일 8시간의 무인 작동 시간
  • 일일 최대 30,000개의 콜로니를 스크리닝 및 피킹

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