항원/면역원 발굴 및 최적화

면역원 발굴과 백신 개발을 위한 솔루션

백신 개발 워크플로는 플랫폼(예: 비활성화된 바이러스 vs. DNA 백신)에 따라 크게 달라지며, 각 플랫폼은 나름대로의 장점을 가집니다. 전염병 예방혁신 연합(Coalition for Epidemic Preparedness Innovations, CEPI)과 여러 다른 기관들은 팬데믹 기간 동안 감염원에 성공적으로 대응할 수 있는 가능성을 높이고자 다양한 접근법을 홍보하고 있습니다.

이 동영상에서는 BioPharma 플랫폼의 관리자인 Justin Dranschak이 재조합 단백질을 면역원으로 사용한 우리의 백신 개발 실험과정 솔루션을 검토하고 연구를 보조할 수 있는 시스템을 참고자료로 제시합니다.

https://share.vidyard.com/watch/VMz74R2JyixorrzhW1Pank

항원/면역원 발굴 실험과정

백신 개발 워크플로

1단계: 바이러스 특이적 항체 결합을 위한 스크리닝

파지 디스플레이는 강력한 생체 외 방법으로 바이러스 항원에 대한 수백만 개의 항체를 스크리닝하는 데 사용될 수 있습니다. 이렇게 선별된 항체는 잠재적인 백신 후보로 간주됩니다.

2단계: 면역원 특성 분석

파지 디스플레이는 항원-항체 결합만을 스크리닝하므로, 이전 단계에서 식별된 항원이 면역 반응을 시작하는지 파악하기 위해 면역원성 연구를 수행합니다. 항원이 면역 반응을 유발(보통 ELISA를 이용하여 측정)하면 면역원으로 간주되며 다음 단계로 이동합니다. 추가적인 면역원 특성 분석은 다음 단계에서 원하는 특성을 가진 면역원을 제조하는 데 사용됩니다.

3단계: 단백질(면역원) 공학

면역원의 일부 특성은 동물이나 인간에 주입하였을 때 원치 않는 효과를 유발하는 것으로 알려져 있습니다. 따라서, CRISPR/Cas9와 같은 유전 공학 도구를 이용하여 면역원을 암호화하는 DNA를 조작하고, 그러한 특성을 더 이상 보유하지 않도록 합니다.

4단계: 세포 Transfection 및 클로닝

DNA가 최적화되면, 추가 검사를 위한 면역원 생산 규모를 증가시킬 필요가 있습니다. 이 단계에서는 고발현 클론 유래 세포주를 생성하는 것이 중요합니다. 특히 mammalian cell line를 사용하는 경우, 이 과정은 마이크로Well 플레이트에 대한 단일 세포 클로닝을 비롯하여 위에서 설명한 유전 공학 기법을 포함하는 경우가 많습니다.

5단계: Titer를 포함한 품질 속성 스크리닝

단일 세포 클로닝 후, 세포주 생장을 모니터링하고 단백질 발현을 평가합니다. 이후, 면역원을 정제하고 면역 반응 유도를 위해 동물에 주입할 준비를 합니다. 동물로부터 생성된 항체는 바이러스 중화 assay로 스크리닝하여 백신의 효능을 결정합니다.

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